pRK5-HA-Ub 全套质粒（K-only ）清单和KR 单点突变质粒全套，泛素化研究（1600）元

发布时间：2026-07-05 来源：

pRK5-HA-Ub 全套质粒清单
一、K-only 单链泛素全套（仅保留 1 个 K，同源链鉴定，含 HA-Ub-K48）

质粒全称	Addgene 货号	突变说明	核心用途
pRK5-HA-Ubiquitin-WT	#17608	野生型泛素，7 个 K 均正常	总泛素化阳性对照
pRK5-HA-Ubiquitin-K0	#17603	全部 K 突变为 R，无多聚泛素	阴性对照，仅单泛素化
pRK5-HA-Ubiquitin-K6	#121151	仅 K6 保留，其余 K→R	K6 同源泛素链检测
pRK5-HA-Ubiquitin-K11	#22901	仅 K11 保留，其余 K→R	K11 链（细胞周期 / DNA 损伤）
pRK5-HA-Ubiquitin-K27	#22902	仅 K27 保留，其余 K→R	K27 链（膜蛋白转运、自噬）
pRK5-HA-Ubiquitin-K29	#22903	仅 K29 保留，其余 K→R	K29 链（溶酶体降解）
pRK5-HA-Ubiquitin-K33	#121152	仅 K33 保留，其余 K→R	K33 链（激酶调控）
pRK5-HA-Ubiquitin-K48	#17605	仅 K48 保留，其余 K→R	K48 链（蛋白酶体降解，你要的目标质粒）
pRK5-HA-Ubiquitin-K63	#17606	仅 K63 保留，其余 K→R	K63 链（信号通路、自噬）

二、KR 单突变全套（单位点失活反向验证）
KR 单点突变质粒全套核心用途汇总

质粒全称	Addgene 货号	突变说明	核心用途
pRK5-HA-Ubiquitin-K6R	#121153	K6 突变为 R，其余 K 正常	反向验证底物是否依赖K6 型泛素链修饰；若转染后底物泛素化水平显著下降，证明蛋白泛素修饰主要依靠 K6 连接链，常用于线粒体损伤、蛋白质量控制相关通路研究
pRK5-HA-Ubiquitin-K11R	#17601	K11 突变为 R，其余 K 正常	阻断 K11 同源泛素链合成，验证底物泛素化是否依赖 K11 链；K11 链主要参与细胞周期调控、纺锤体组装、DNA 损伤应答、内质网相关降解（ERAD）
pRK5-HA-Ubiquitin-K27R	#17600	K27 突变为 R，其余 K 正常	缺失 K27 连接位点，判断底物修饰是否依赖 K27 泛素链；多用于膜蛋白分选、线粒体自噬、DNA 修复、表观调控蛋白泛素化检测
pRK5-HA-Ubiquitin-K29R	#17602	K29 突变为 R，其余 K 正常	封闭 K29 泛素连接位点，反向鉴定 K29 链修饰底物；K29 链多介导非蛋白酶体途径降解、溶酶体分选与细胞信号抑制
pRK5-HA-Ubiquitin-K33R	#121154	K33 突变为 R，其余 K 正常	消除 K33 链形成能力，验证激酶、免疫通路蛋白是否发生 K33 泛素修饰；K33 链主要调控蛋白激酶活性、免疫受体信号转导
pRK5-HA-Ubiquitin-K48R	#17604	K48 突变为 R，其余 K 正常	最常用对照质粒；阻断经典降解型 K48 泛素链合成。若底物泛素化大幅减弱，说明该蛋白依靠 K48 链介导 26S 蛋白酶体降解，用于降解通路反向验证
pRK5-HA-Ubiquitin-K63R	#17607	K63 突变为 R，其余 K 正常	缺失 K63 连接位点，验证信号型 K63 泛素链；K63 链不介导降解，主要参与炎症免疫、自噬、DNA 损伤修复、内吞转运

表格

对比维度	pRK5 优势	pcDNA3.1 短板
载体大小	更小，转染效率高、表达量高	骨架更大，同等条件表达偏低
转录背景	无真核抗性，杂带少，IP 干净	携带 Neo，额外转录增加背景
泛素实验通用性	行业标准，全套 Ub 突变质粒现成	很少有成熟全套 HA-Ub 现货
测序便捷度	SP6 通用引物，成本低	多用 CMV 定制引物
瞬时实验适配	专为瞬时 CoIP、泛素 IP 设计	侧重稳定株构建

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pRK5-HA-Ub 全套质粒（K-only ）清单和KR 单点突变质粒全套 ，泛素化研究 （1600） 元

pRK5-HA-Ub 全套质粒（K-only ）清单和KR 单点突变质粒全套，泛素化研究（1600）元