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植物研究全套亚细胞定位质粒 + Marker 质粒 280元

发布时间:2026-05-19 来源:


植物研究全套亚细胞定位质粒 + Marker 质粒     280

一、基础融合空载质粒(构建目的基因用)


质粒名称荧光抗性适用场景
pCAMBIA1300-35S-GFP绿色潮霉素 Hyg最通用,瞬转 + 稳转
pCAMBIA1300-35S-mCherry红色潮霉素 Hyg红色融合空载
p16318-GFP绿色卡那 Kan原生质体专用高表达
pBI121-GFP绿色卡那 Kan烟草瞬时侵染
pCAMBIA2300-GFP绿色卡那 Kan大田作物稳定转化
pFGC5941-GFP绿色草铵膦 Bar基因沉默 + 表达双用

二、八大细胞器全套定位 Marker 质粒

1. 细胞核 Nucleus

  • H2B-GFP 绿色 核标记

  • H2B-mCherry 红色(最常用)

  • NLS-GFP / NLS-mCherry 核信号肽标记

2. 细胞膜 Plasma Membrane

  • AtPIP2A-GFP 拟南芥膜

  • AtPIP2A-mCherry 通用膜 Marker

  • OsPIP1;1-mCherry 水稻专用细胞膜

3. 内质网 ER

  • GFP-HDEL 绿色内质网

  • BiP-mCherry 红色内质网首选

4. 高尔基体 Golgi apparatus

  • ST-GFP 绿色高尔基体

  • ST-mCherry 经典高尔基体 Marker

5. 液泡膜 Tonoplast

  • γ-TIP-GFP 液泡膜

  • γ-TIP-mCherry 液泡膜标准标记

6. 叶绿体 Chloroplast

  • SSU-GFP 叶绿体转运肽

  • SSU-mCherry 叶绿体首选

7. 线粒体 Mitochondria

  • COX4-GFP 绿色线粒体

  • COX4-mCherry 全网通用线粒体 Marker

8. 过氧化物酶体 Peroxisome

  • GFP-PTS1 (SKL) 绿色

  • PTS1-mCherry 红色过氧化物酶体

三、其他细胞结构 Marker

  1. 细胞质:35S-GFP、35S-mCherry(游离对照)

  2. 细胞壁:CWP1-mCherry

  3. 细胞骨架微管:TUA6-GFP

  4. 微丝:ABD2-mCherry

  5. 质外体:分泌信号肽 - SP-GFP

四、荧光分类

绿色荧光 GFP 系列全套 Marker

H2B-GFP、PIP2A-GFP、GFP-HDEL、ST-GFP、γ-TIP-GFP、SSU-GFP、COX4-GFP、GFP-PTS1

红色荧光 mCherry 全套 Marker(共定位首选)

H2B-mCherry(核)

AtPIP2A-mCherry(细胞膜)

BiP-mCherry(内质网)

ST-mCherry(高尔基体)

γ-TIP-mCherry(液泡)

SSU-mCherry(叶绿体)

COX4-mCherry(线粒体)

PTS1-mCherry(过氧化物酶体)

五、抗性分类

  1. 潮霉素 Hyg:pCAMBIA1300 系列,拟南芥首选

  2. 卡那霉素 Kan:pBI121、p16318,烟草瞬转

  3. 草铵膦 Bar:水稻、玉米、小麦稳定株系

  4. 氨苄 Amp:大肠杆菌克隆扩增

六、实验标准方案

  1. 载体构建:目的基因插入pCAMBIA1300-35S-GFP

  2. 共定位:与各类mCherry 细胞器 Marker混合侵染

  3. 侵染菌株:农杆菌 GV3101

  4. 观察时间:烟草 48~72h

  5. 原生质体:PEG 转化,16318 载体表达最强

七、(实验室常备)

  1. H2B-mCherry 细胞核

  2. AtPIP2A-mCherry 细胞膜

  3. BiP-mCherry 内质网

  4. ST-mCherry 高尔基体

  5. γ-TIP-mCherry 液泡

  6. SSU-mCherry 叶绿体

  7. COX4-mCherry 线粒体

  8. PTS1-mCherry 过氧化物酶体

  9. pCAMBIA1300-35S-GFP 构建空载

  10. 35S-mCherry 细胞质对照

质粒名称原核抗性启动子标签蛋白来源物种宿主用途
pCAMBIA1300-GHD7-GFPK35SGFP水稻表皮细胞注射细胞核
pCAMBIA1300-GHD7-mCherryK35SmCherry水稻表皮细胞注射细胞核
pCAMBIA1300-GHD7-CFPK35SCFP水稻表皮细胞注射细胞核
puc-2*35S-GHD7-eGFPA35SGFP水稻原生质体转化细胞核
PUC-35S-GHD7-mCherryA35SmCherry水稻原生质体转化细胞核
PUC-35S-GHD7-CFPA35SCFP水稻原生质体转化细胞核
pCAMBIA1300-H2B-GFPK35SGFP拟南芥表皮细胞注射细胞核
P2300-H2B-mCherryK35SmCherry拟南芥表皮细胞注射细胞核
pCAMBIA1300-H2B-CFPK35SCFP拟南芥表皮细胞注射细胞核
puc-2*35S-H2B-GFPA35SGFP拟南芥原生质体转化细胞核
PUC-35S-H2B-mCherryA35SmCherry拟南芥原生质体转化细胞核
PUC-35S-H2B-CFPA35SCFP拟南芥原生质体转化细胞核
pCAMBIA1300-PIP2A-GFPK35SGFP拟南芥表皮细胞注射细胞膜
pCAMBIA1300-PIP2A-mCherryK35SmCherry拟南芥表皮细胞注射细胞膜
pCAMBIA1300-PIP2A-CFPK35SCFP拟南芥表皮细胞注射细胞膜
puc-2*35S-PIP2A-eGFPA35SGFP拟南芥原生质体转化细胞膜
PUC-35S-PIP2A-mCherryA35SmCherry拟南芥原生质体转化细胞膜
PUC-35S-PIP2A-CFPA35SCFP拟南芥原生质体转化细胞膜
pCAMBIA1300-HSBP-GFPK35SGFP拟南芥表皮细胞注射细胞质
pCAMBIA1300-HSBP-mCherryK35SmCherry拟南芥表皮细胞注射细胞质
pCAMBIA1300-HSBP-CFPK35SCFP拟南芥表皮细胞注射细胞质
puc-2*35S-HSBP-eGFPA35SGFP拟南芥原生质体转化细胞质
PUC-35S-HSBP-mCherryA35SmCherry拟南芥原生质体转化细胞质
PUC-35S-HSBP-CFPA35SCFP拟南芥原生质体转化细胞质
pCAMBIA1300-OsSPP1(ER)-GFPK35SGFP水稻表皮细胞注射内质网
1300-OsSPP1(ER)-RFPK35SRFP水稻表皮细胞注射内质网
pCAMBIA1300-OsSPP1(ER)-CFPK35SCFP水稻表皮细胞注射内质网
puc-2*35S-OsSPP1(ER)-eGFPA35SGFP水稻原生质体转化内质网
PUC-35S-OsSPP1(ER)-RFPA35SRFP水稻原生质体转化内质网
PUC-35S-OsSPP1(ER)-mcherryA35SmCherry水稻原生质体转化内质网
PUC-35S-OsSPP1(ER)-CFPA35SCFP水稻原生质体转化内质网
pCAMBIA1300-ER(WAK2)-GFPK35SGFP拟南芥表皮细胞注射内质网
ER(WAK2)-cherryK35SmCherry拟南芥表皮细胞注射内质网
pCAMBIA1300-ER(WAK2)-CFPK35SCFP拟南芥表皮细胞注射内质网
puc-2*35S-ER(WAK2)-eGFPA35SGFP拟南芥原生质体转化内质网
PUC-35S-ER(WAK2)-mCherryA35SmCherry拟南芥原生质体转化内质网
PUC-35S-ER(WAK2)-CFPA35SCFP拟南芥原生质体转化内质网
1300-OsManI(Glogi)-RFPK35SRFP水稻表皮细胞注射高尔基体
PUC-35S-OsManI-RFPA35SRFP水稻原生质体转化高尔基体
1300-ManI-mcherryK35SmCherry大豆表皮细胞注射高尔基体
PUC-35S-ManI-RFPA35SRFP大豆原生质体转化高尔基体
1300-PTS1(guo)-RFPK35SRFP拟南芥表皮细胞注射过氧化物酶体
PUC-35S-PTS1-mCherryA35SmCherry拟南芥原生质体转化过氧化物酶体
1300-COX4(mito)-RFPK35SRFP拟南芥表皮细胞注射线粒体
1300-COX4(mito)-mcherryK35SmCherry拟南芥表皮细胞注射线粒体
PUC-35S-COX4-mCherryA35SmCherry拟南芥原生质体转化线粒体
1300-VAMP711-RFPK35SRFP拟南芥表皮细胞注射液泡
PUC-35S-VAMP711-CFPA35SCFP拟南芥原生质体转化液泡
pCAMBIA1300-OsTIP-mCherryK35SmCherry水稻表皮细胞注射液泡
PUC-35S-OsTIP-mCherryA35SmCherry水稻原生质体转化液泡
pCAMBIA1300-OsALDH2a-mCherryK35SmCherry水稻表皮细胞注射线粒体
PUC-35S-OsALDH2a-mCherryA35SmCherry水稻原生质体转化线粒体
pCAMBIA1300-AtTPK1-mCherryK35SmCherry拟南芥表皮细胞注射液泡
PUC-35S-AtTPK1-mCherryA35SmCherry拟南芥原生质体转化液泡
pCAMBIA1300-OsAPX3-mCherryK35SmCherry水稻表皮细胞注射过氧化物酶体
PUC-35S-OsAPX3-mCherryA35SmCherry水稻原生质体转化过氧化物酶体