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乳酸乳球菌NZ9000 . 400元
| 菌株名称 | 菌株类型 | 核心基因型 | 核心特点 | 培养条件 | 抗性标记 | GRAS认证 | 主要用途 |
| 乳酸乳球菌NZ9000 | 革兰氏阳性菌，乳酸乳球菌 | MG1363衍生菌株，染色体整合nisR和nisK基因，乳链菌肽阴性 | 食品级微生物，生长迅速，代谢简单，基因组小易操作，抗原性弱，自身蛋白分泌少，无强烈免疫应答 | 30℃，兼性厌氧，常用M17培养基 | - | 是 | 乳酸菌基因工程模式宿主，NICE诱导表达系统配套宿主，食品级蛋白表达、疫苗抗原递送、食品发酵工业 |
乳酸乳球菌 NZ9000 完整介绍
一、基础分类与来源
学名：Lactococcus lactis subsp. cremoris NZ9000
亲本菌株：MG1363（无内源质粒、不产乳链菌肽 nisin 的模式乳酸乳球菌）
基因型：pepN::nisRK
构建方式：将双组分调控基因 nisR、nisK 定点整合至基因组氨肽酶基因 pepN 位点，敲除内源氨肽酶同时获得 NICE 诱导系统，自身不合成 nisin，仅负责感应外源 nisin 信号。
二、核心功能：NICE（Nisin 可控表达系统）原理
NisK：膜组氨酸激酶，感知培养基中微量乳链菌肽 nisin；
NisR：胞内响应调控蛋白，接收 NisK 磷酸化信号后激活质粒上 PnisA 启动子；
配套质粒（pNZ8148、pNZ8149 等）搭载 PnisA，加入 0.1–5 ng/mL nisin 即可精准开启目的蛋白表达，本底极低、诱导梯度宽、可控性极强。
三、菌株核心优势
食品级 GRAS 安全菌株
乳酸菌，无内毒素、无致病性，可用于口服益生菌、食品级外源蛋白递送，动物体内免疫原性低，适合黏膜疫苗表达。
蛋白降解弱，目的蛋白回收率高
胞外几乎无游离蛋白酶，仅存少量膜结合 HtrA；
自身分泌蛋白极少（仅 Usp45），纯化背景干净；
pepN 敲除减少胞内氨肽酶降解，适合不稳定、毒性蛋白表达。
质粒兼容性强
可同时兼容两类载体：
NICE 诱导型：pNZ8148（氯霉素抗性）；
组成型载体：pMG36e（红霉素抗性，P36 持续表达，无需诱导剂）。
培养简便
兼性厌氧，30℃静置培养即可，无需强通气；M17 + 葡萄糖通用培养基，操作门槛低。
四、培养与转化条件
培养基：M17 肉汤 / 平板，添加 1% 葡萄糖；
培养温度：30 ℃，静置厌氧培养；
转化方式：电转（标准参数 2000 V、25 μF、200 Ω），转化前用含甘氨酸的 SGM17 培养基弱化细胞壁提升效率；
诱导条件：菌体 OD₆₀₀=0.4–0.6 时加入 nisin，诱导 4–16 h；
保存：-80 ℃甘油菌长期保藏，短期 4℃斜面。
五、主要应用场景
可控诱导外源蛋白表达（首选搭配 pNZ8148）
毒性蛋白、膜蛋白、酶、荧光报告蛋白，精准调控表达量避免菌体死亡。
食品级组成型稳定表达（搭配 pMG36e）
益生菌工程菌、口服抗原、食品酶制剂，无诱导剂降低生产成本。
黏膜疫苗 / 递送载体
口服重组乳酸乳球菌，在肠道持续分泌抗原，刺激黏膜免疫。
代谢工程、乳酸菌基因敲除 / 回补、蛋白分泌机制研究
乳制品发酵、益生菌功能改造、抑菌肽表达。
六、局限性
生长速率慢，菌体密度低于枯草芽孢杆菌 WB800N，发酵产量上限偏低；
严格依赖 nisin 诱导（NICE 系统），大规模发酵会增加原料成本；
有氧条件下生长受抑制，不适合高密度好氧发酵；
膜蛋白过量表达易造成细胞膜压力，需优化诱导剂量。
七、配套质粒搭配速记
表格
| 实验需求 | 推荐质粒 | 特点 |
|---|---|---|
| 严谨诱导、低本底、毒性蛋白 | pNZ8148 | PnisA、氯霉素抗性、NICE 系统专用 |
| 无诱导、低成本持续表达 | pMG36e | P36 组成型、红霉素抗性 |
NZ9000：乳酸菌、GRAS 食品级、Nisin 诱导、厌氧、适合口服 / 黏膜递送；
