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萤光素酶检测需要使用什么仪器?


A基于萤光素酶反应原理的检测系统,需要使用发光检测仪(Luminometer),或者带有发光检测模块的多功能微孔板检测仪。不同的仪器灵敏度和信号相互干扰程度,差异较大。(详情请登录 Promega 官网查阅)  QPromega 的新品 NanoLuc® 萤光素酶与经典萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶相比,到底有哪些特点和优势呢?ANanoLuc® 萤光素酶是一种新的萤光素酶,来源于深海细角刺虾,是一个 19kDa 的蛋白质。经过对蛋白质结构的优化,和对特异性底物的改造之后,在细胞中表达的 NanoLuc® 萤光素酶与底物 Furimazine 反应,可使哺乳动物细胞的发光活性提高约 250 万倍。 NanoLuc® 萤光素酶辉光型检测试剂的信号半衰期大于两小时,而信号强度大约是等量的同类反应条件下萤火虫萤光素酶或海肾萤光素酶的 150 倍。在哺乳动物细胞中,NanoLuc® 萤光素酶未显示翻译后修饰或亚细胞分区的迹象。 该酶具有很高的物理稳定性,可以在高达 55 ℃ 的温度下或在 37 ℃的培养基中保温 15 小时以上而保持活性。因为其分子量小,发光强度大,稳定性高,除了作为报告基因用于基因表达调控研究,它还可以用作蛋白质融合表达标签,并开发了一系列新的应用方向,例如蛋白质相互作用研究,蛋白质降解研究(PROTAC),细胞活力和凋亡实时监测等等。