枯草芽孢杆菌表达系统构建

枯草芽孢杆菌表达系统与其他表达系统相比，优势在于表达宿主本身的非致病性；表达的蛋白不混有内毒素；没有密码子偏爱性可以改为没有明显的偏爱密码子；并且拥有一套高效的分泌信号肽及分子伴侣系统，而且在多数情况下，芽孢杆菌分泌的真核来源的重组蛋白具有天然构象和生物活性，避免形成包涵体；表达周期短，蛋白产率高。

目前用芽孢杆菌系统成功表达的真核基因产物有白介素-3(IL-3)、乙肝核心抗原、乙肝PreS2抗原、丙肝病毒壳蛋白、HIV p4Ispf-1蛋白等；成功表达的原核基因产物有甘油-3-磷酸脱氢酶、甘油激酶、纤维素酶、色氨酸合成酶等。

本公司可以根据客户需求进行载体改造和宿主菌改造，或者采用商业化的载体（pHT43载体，配套菌WB800或WB800N)，可以提供胞内或胞外、组成型或诱导型的表达；可以提供GST、His、HA，Flag、myc、MBP等标签。

服务内容

1、亚克隆：亚克隆至两个适当的表达载体中，制备大量质粒，构建线性化载体。
2、表达条件优化及评估：将线性载体转化至适合的寄主菌株中，通过PCR方法确定阳性转化株，表达条件优化及确认——确定培养基及诱导浓度，SDS-PAGE以及Western blot分析。
3、蛋白表达及纯化：少量表达，纯度达90%以上。

服务价格及周期

载体选择

服务承诺

1、基因合成和载体构建参见相关服务部分。
2、本公司会在最短的时间内快速完成实验，并为客户提供足量蛋白以满足科研需求。
3、提供完整的实验报告。
4、提供合乎客户要求量和纯度的特定蛋白。

枯草芽孢杆菌感受态细胞

      枯草芽孢杆菌是革兰氏阳性菌，细胞壁不含脂多糖（LPS），表达的蛋白无需额外去除内毒素，适合医药或食品级应用；天然具有高效的分泌系统，可将目标蛋白直接分泌到培养基中，简化纯化步骤；多数情况下无包涵体问题，表达的可溶性蛋白正确折叠，尤其适合含二硫键的蛋白（胞外环境有助于氧化折叠）；培养简单，生长快，普通LB培养基、37℃振荡即可快速生长，发酵工艺成熟，成本低。具有不同玉大肠的毒性原理，大量在大肠杆菌中有毒的蛋白可以在枯草芽孢杆菌中成功表达。

      选择合适的宿主菌株是您试验成功的开始，本公司提供多种具有不同特点的枯草芽孢杆菌感受态和表达质粒供您选择，为您的蛋白表达实验提供便捷。