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| 产品货号 | 产品类型 | 装载载体 | 基因信息 | 产品价格 | 出货周期 |
|---|---|---|---|---|---|
| 495 | MAMs（ER‑线粒体）共定位 | EGFP‑Sec61β：内质网膜胞质面（内质网）；
TOMM20‑mCherry：线粒体外膜（线粒体）；
MAMs（ER‑线粒体）共定位 | 800 | 现货 |
EGFP‑Sec61β：内质网膜胞质面（内质网）；
TOMM20‑mCherry：线粒体外膜（线粒体）；
蛋白定位解析
EGFP‑Sec61β
标签：绿色荧光蛋白 EGFP；
Sec61β：Sec61 复合体的 β 亚基，锚定在内质网膜上，蛋白 N‑端位于内质网胞质侧，C‑端处于内质网腔内侧；
整体标记：内质网膜，荧光信号代表内质网轮廓。
TOMM20‑mCherry
标签：红色荧光蛋白 mCherry；
TOMM20：线粒体外膜 TOM 复合体组分，全长定位于线粒体外膜，结构域暴露在细胞质一侧；
整体标记：线粒体外膜，用来观察线粒体形态。
实验层面要点
两者分别为经典细胞器标记：绿色标记内质网、红色标记线粒体；可共转细胞用来观察线粒体‑内质网接触位点（MAM 区域），红绿荧光重叠处即为 MAM；
拓扑总结：
Sec61‑β：跨内质网膜，EGFP（荧光）留在细胞质侧；
TOMM20‑mCherry：锚定线粒体外膜，mCherry 同样暴露于细胞质；
适用研究：细胞器形态观察、MAM 互作、细胞器动态变化。
做 MAMs 实验必须选线粒体外膜（OMM）质粒（荧光在胞质侧）；线粒体基质质粒不适合 MAMs 共定位。
一、线粒体外膜质粒（替代 TOMM20‑mCherry，适配 Sec61β‑EGFP 做 MAMs 共定位 / BiFC）
拓扑要求：荧光蛋白放在 N‑端，暴露在细胞质一侧，和 EGFP‑Sec61β 空间贴近，适合 MAMs 实验Addgene。
1、常用全长蛋白标记质粒（Addgene 现成质粒）
OMP25（SYNJ2BP）‑mCherry #157758
OMP25 是 C 端锚定 TA 蛋白，跨膜区嵌入线粒体外膜；N‑端 mCherry 游离在胞质；
优势：不属于 TOM 复合体，不会干扰 TOM20‑VDAC1‑IP3R3 的 MAMs 复合物；可以用来排除 TOM20 本身带来的干扰；
载体：pCDH‑C1 瞬时、pCDH‑Puro 慢病毒稳株。
ActA‑tail‑anchor 荧光质粒 #177433
ActA 的 C‑末端跨膜片段，仅短短 20aa 跨膜区；荧光（GFP/mCherry）N‑端位于胞质；片段短小，几乎不会改变线粒体外膜原生环境，MAMs 实验非常稳妥。
TOMM70‑EGFP / mCherry
TOM 复合体另一受体蛋白，N‑端在胞质；缺点属于 TOM 家族，过表达有可能轻微影响 MAMs。
VDAC1‑mCherry（线粒体外膜经典蛋白）
VDAC1 就是 MAMs 复合物的组成蛋白；pcDNA3.1‑HA‑VDAC1‑mCherry；既可以做 MAMs 成像，同时可用来 Co‑IP 验证 GRP75‑IP3R3‑VDAC1 复合体。
2、BiFC 专用片段质粒（MAMs 实验黄金搭配）
只截取跨膜短片段，全长蛋白过表达容易产生人为影响；
Mito‑VC‑ActA‑TM：ActA 跨膜序列连接 VC；
ER‑VN‑Sec61β‑VN；二者距离＜30nm 才发光；替代 TOMM20‑VC。
二、线粒体基质质粒（严禁用于 MAMs 共定位，仅观察线粒体整体形态）
原理问题：荧光全部在线粒体基质，隔着线粒体外膜，距离 ER 太远；和 Sec61β‑EGFP 共定位 Pearson 值偏低，会低估 MAMs。
COX8A‑EGFP‑mCherry（COX‑VIII 前导肽引导进基质），最经典线粒体基质标记质粒，Addgene #55796；
mito‑TagRFP；mito‑Turquoise2‑CFP（蓝色荧光，三通道成像：ER‑GFP+mito‑BFP+Paxillin‑mCherry）Addgene。
三、质粒选型推荐（贴合你的课题 MAMs‑黏着斑 FA）
普通共定位（替代 TOMM20‑mCherry）首选：mCherry‑OMP25（#157758）；排除 TOM 复合体干扰；和 EGFP‑Sec61β 配对；
BiFC 实验优先：mCherry‑ActA‑TM‑VC；
对照组观察线粒体整体形态：COX8A‑mCherry；
做功能验证：VDAC1‑Flag‑mCherry 质粒。
四、搭配组合给你敲定
实验组：EGFP‑Sec61β + mCherry‑OMP25 + mTagBFP2‑Paxillin（黏着斑）三通道荧光；
对照组：ER‑KDEL‑EGFP + mito‑RFP‑COX8A，仅看细胞器整体形态。
五、一句话总结区分
TOMM20、OMP25、ActA‑TM、VDAC1：荧光在胞质侧，适合 MAMs 共定位；
COX‑VIII：荧光在线粒体基质，不适合 MAMs 定量。
MAMs 共定位实验组（优先）：mCherry‑TOMM20、mCherry‑OMP25‑ActA‑TM（线粒体外膜，荧光胞质侧）搭配 EGFP‑Sec61β；
