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| 产品货号 | 产品类型 | 装载载体 | 基因信息 | 产品价格 | 出货周期 |
|---|---|---|---|---|---|
| 473 | 大肠杆菌–乳酸菌穿梭组成型表达载体（革兰氏阳性菌通用） | pMG36e | 大肠杆菌–乳酸菌穿梭组成型表达载体（革兰氏阳性菌通用） | 99 | 现货 |
pMG36e
pMG36e 载体完整介绍
一、基础核心参数
pMG36e质粒图谱
MCS多克隆位点详图
载体类型：大肠杆菌–乳酸菌穿梭组成型表达载体（革兰氏阳性菌通用）
全长：3610 bp（约 3.6 kb）
骨架来源：pWV01 复制子骨架
筛选抗性：红霉素抗性 Emʳ（Erythromycin）
大肠杆菌筛选：200 μg/mL Ery
乳酸乳球菌 / 乳杆菌：5–10 μg/mL Ery
表达模式：P32 强组成型启动子，无需诱导剂，全程持续表达外源蛋白
终止元件：prtP 基因转录终止子 T，保证转录终止
拷贝数：乳酸菌内中高拷贝；大肠杆菌可稳定扩增
原始文献：van de Guchte et al., Appl Environ Microbiol, 1989（经典乳酸菌表达载体）
二、关键功能元件
ori pWV01：广宿主复制子，同时在大肠杆菌、乳酸乳球菌、多种乳杆菌、枯草杆菌复制；含 repA/repC 复制蛋白基因
P32 启动子：乳酸乳球菌来源强组成型启动子，在绝大多数乳酸菌中高效转录
MCS 多克隆位点（插入外源基因区域，顺序）：
EcoRI → SmaI/XmaI → XbaI → ClaI → XhoI → SalI → PstI → SphI → HindIII
配套核糖体结合位点 RBS，保证翻译起始效率
Emʳ 红霉素抗性基因：大肠杆菌 + 乳酸菌双宿主筛选标记
三、适用宿主
克隆扩增宿主（提质粒用）
大肠杆菌 MC1061 / DH5α，37℃ LB 培养
表达宿主（目标菌）
乳酸乳球菌 Lactococcus lactis（最常用）
各类乳杆菌：植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌等
枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis
培养温度：乳酸菌 30℃静置 / 微氧培养
四、核心优势
穿梭双宿主：大肠杆菌快速构建质粒，直接电转乳酸菌表达，无需亚克隆
组成型无诱导：不用 IPTG、nisin 等诱导剂，培养即稳定表达，操作简单
广宿主革兰阳性：几乎所有常见乳酸菌均可使用，乳酸菌领域标准工具载体
载体分子量小（3.6 kb），可容纳大片段外源基因插入
五、主流实验用途
乳酸菌胞内异源蛋白组成型表达（酶、抗原、细菌素、报告蛋白）
工程益生菌构建、口服疫苗载体（乳酸菌作为递送载体表达抗原）
细菌素抑菌机制、代谢通路基因功能研究
食品级益生菌基因改造（后续可敲除红霉素抗性改造食品级载体）
六、常规实验流程简要
外源基因酶切，连入 pMG36e 的 MCS；
转化大肠杆菌 MC1061，Ery 筛选、测序验证；
大提质粒，电转化乳酸乳球菌 / 乳杆菌感受态；
30℃培养，直接收集菌体检测蛋白表达（无需诱导）。
