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| 产品货号 | 产品类型 | 装载载体 | 基因信息 | 产品价格 | 出货周期 |
|---|---|---|---|---|---|
| 163724 | 乳酸诱导表达系统 | pJH625_pJH_LldR_PlldR-sfGFP.0TAG | pJH625_pJH_LldR_PlldR-sfGFP.0TAG | 1600 | 现货 |
乳酸诱导表达系统
一、质粒基本信息
全称：pJH625_pJH_LldR_PlldR-sfGFP.0TAG
发表文献：Ho et al., Nucleic Acids Res., 2021（构建无渗漏表达的抑制 tRNA 前馈环路）
用途：乳酸诱导型表达 sfGFP（0 个琥珀终止密码子），作为诱导表达系统的野生型对照。
二、命名拆解（元件一目了然）
pJH625：载体骨架编号（pBR322 衍生，高拷贝，AmpR）
pJH_LldR：LldR 乳酸调控蛋白（抑制子）组成型表达单元
PlldR：乳酸诱导型启动子（LldR 的响应启动子）
sfGFP：超折叠绿色荧光蛋白（Superfolder GFP，荧光强、折叠快）
.0TAG：sfGFP 基因内不含琥珀终止密码子（TAG），即野生型 sfGFP。
三、核心功能元件
1. 骨架元件（pBR322 衍生）
ori：ColE1 复制起点（高拷贝，~500–700/cell）
AmpR：氨苄青霉素抗性基因（筛选标记，100 μg/mL）
2. 乳酸感应模块（LldR/PlldR）
LldR：GntR 家族转录抑制子，无乳酸时结合 PlldR，抑制转录；有 L - 乳酸时结合乳酸，脱离启动子，解除抑制。
PlldR：大肠杆菌 lldPRD 操纵子启动子，严格响应 L - 乳酸（D - 乳酸不诱导）。
3. 报告基因
sfGFP.0TAG：野生型超折叠 GFP，无提前终止密码子，乳酸诱导后高效表达绿色荧光。
四、工作原理（乳酸诱导表达）
无乳酸：LldR 二聚体结合 PlldR 启动子，完全抑制 sfGFP 转录，无荧光（无渗漏）。
加 L - 乳酸：乳酸进入细胞结合 LldR，构象改变，LldR 脱离 PlldR，RNA 聚合酶启动转录，sfGFP 高效表达，发绿色荧光。
.0TAG 意义：作为对照质粒，与含 1/2/10/15 个 TAG 的衍生质粒（如 #163730）对比，验证琥珀抑制系统的效率与渗漏。
五、关键应用场景
乳酸诱导表达系统的野生型对照（核心用途）
肿瘤微环境乳酸感应（肿瘤高乳酸，诱导基因表达）
合成生物学基因回路（乳酸作为输入信号）
无渗漏表达工具（LldR/PlldR 本底极低）
六、衍生质粒（同系列，含 TAG 终止密码子）
#163724：sfGFP.0TAG（野生型对照）
#163721：sfGFP.1TAG（1 个琥珀密码子）
#163738：sfGFP.2TAG（2 个琥珀密码子）
#163730：sfGFP.15TAG（15 个琥珀密码子）
Purpose
Lactate-inducible expression of green fluorescent protein encoding zero amber codons
Depositing Lab
Publication
Ho et al Nucleic Acids Res. 2021 Mar 18;49(5):e25. doi: 10.1093/nar/gkaa1179.( How to cite )
Sequence Information
Ordering
Backbone
Vector backbone
pBR322
Vector type
Bacterial Expression
Growth in Bacteria
Bacterial Resistance(s)
Ampicillin, 100 μg/mL
Growth Temperature
37°C
Growth Strain(s)
NEB Stable
Copy number
High Copy
Gene/Insert
Gene/Insert name
lldr gfp
Species
Synthetic
Cloning Information
Cloning methodGibson Cloning
Resource Information
Terms and Licenses
Academic/Nonprofit Terms
Industry Terms
Not Available to Industry
Trademarks:
Zeocin® is an InvivoGen trademark.
