荧光融合蛋白报告载体(细胞器定位示踪载体)哺乳动物系统 398 元一个
荧光融合蛋白报告载体(细胞器定位示踪载体)哺乳动物系统
| 靶向细胞器 / 蛋白 | 质粒名称 | 标准规格 | 激发波长 λ Ex | 发射波长 λ Em |
| 内质网 | GFP-sec61b | 20 μg | 488 nm | 507 nm |
| 内质网 | mCherry-sec61b | 20 μg | 587 nm | 610 nm |
| 线粒体 | TOM20-mCherry | 20 μg | 587 nm | 610 nm |
| 线粒体 | TOM20-GFP | 20 μg | 488 nm | 507 nm |
| 线粒体分裂蛋白 Drp1 | mCherry-Drp1 | 20 μg | 587 nm | 610 nm |
| 微丝 | Lifeact-GFP | 20 μg | 488 nm | 507 nm |
| 微管(小鼠源) | GFP-MAP4 (mouse) | 20 μg | 488 nm | 507 nm |
| 微管(小鼠源) | mCherry-MAP4 (mouse) | 20 μg | 587 nm | 610 nm |
| 溶酶体 | LAMP1-GFP | 20 μg | 488 nm | 507 nm |
载体基础:基于 EGFP-N1 / EGFP-C1 载体改造,自研优化序列;
核心优势:蛋白表达强度高、细胞器定位精准,适配活细胞超分辨成像;
细胞验证:已在 Hela、U2OS、COS7 等常规细胞系完成验证,转染效率约 60%;
应用场景:瞬时转染活细胞观测,转染后可固定细胞用于成像分析。
实验操作步骤
37℃水浴预热 OptiMEM 培养基;
细胞铺板准备:35 mm 玻底皿细胞密度达到 70%~80%;
试剂预处理:取出转染试剂、质粒,瞬时离心收集管壁液体;
配制两管稀释液(各 50 μL OptiMEM):
A 管:加入 1.5 μL 转染试剂,静置 5 min;
B 管:加入 300~500 ng 目的质粒,静置 5 min;
细胞预处理:弃去皿内旧培养基,更换 1 mL 新鲜 OptiMEM;
转染复合物配制:将 A 管全部液体加入 B 管,轻柔吹打混匀,室温静置 20 min;
加样转染:吸取混合液直接滴加至细胞皿,轻晃混匀,放入培养箱孵育 6 h;
换液培养:转染 6 h 后更换完全培养基,继续培养;
成像检测:转染满 24 h 后可上机成像。
备注说明
转染试剂兼容:可使用 Lipo2000 或其他阳离子脂质体转染试剂盒;
条件优化:质粒用量、换液时间可根据成像效果梯度摸索,优化信号强度;
蛋白物种来源:仅微管 MAP4 质粒为小鼠序列,其余全部为人源序列;
质粒图谱:如需质粒图谱文件,联系客服索取;
适用性提示:转染效率、蛋白表达水平受细胞种类、细胞状态影响较大,需自行预实验验证,不保证适配全部细胞系。

CN
