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荧光融合蛋白报告载体(细胞器定位示踪载体)哺乳动物系统 398 元一个

发布时间:2026-06-22 来源:小汇

荧光融合蛋白报告载体(细胞器定位示踪载体)哺乳动物系统


                                                                         


靶向细胞器 / 蛋白质粒名称标准规格激发波长 λ Ex发射波长 λ Em
内质网GFP-sec61b20 μg488 nm507 nm
内质网mCherry-sec61b20 μg587 nm610 nm
线粒体TOM20-mCherry20 μg587 nm610 nm
线粒体TOM20-GFP20 μg488 nm507 nm
线粒体分裂蛋白 Drp1mCherry-Drp120 μg587 nm610 nm
微丝Lifeact-GFP20 μg488 nm507 nm
微管(小鼠源)GFP-MAP4 (mouse)20 μg488 nm507 nm
微管(小鼠源)mCherry-MAP4 (mouse)20 μg587 nm610 nm
溶酶体LAMP1-GFP20 μg488 nm507 nm


  1. 载体基础:基于 EGFP-N1 / EGFP-C1 载体改造,自研优化序列;

  2. 核心优势:蛋白表达强度高、细胞器定位精准,适配活细胞超分辨成像;

  3. 细胞验证:已在 Hela、U2OS、COS7 等常规细胞系完成验证,转染效率约 60%;

  4. 应用场景:瞬时转染活细胞观测,转染后可固定细胞用于成像分析。


实验操作步骤


  1. 37℃水浴预热 OptiMEM 培养基;

  2. 细胞铺板准备:35 mm 玻底皿细胞密度达到 70%~80%;

  3. 试剂预处理:取出转染试剂、质粒,瞬时离心收集管壁液体;

  4. 配制两管稀释液(各 50 μL OptiMEM):

    • A 管:加入 1.5 μL 转染试剂,静置 5 min;

    • B 管:加入 300~500 ng 目的质粒,静置 5 min;

  5. 细胞预处理:弃去皿内旧培养基,更换 1 mL 新鲜 OptiMEM;

  6. 转染复合物配制:将 A 管全部液体加入 B 管,轻柔吹打混匀,室温静置 20 min;

  7. 加样转染:吸取混合液直接滴加至细胞皿,轻晃混匀,放入培养箱孵育 6 h;

  8. 换液培养:转染 6 h 后更换完全培养基,继续培养;

  9. 成像检测:转染满 24 h 后可上机成像。


备注说明


  1. 转染试剂兼容:可使用 Lipo2000 或其他阳离子脂质体转染试剂盒;

  2. 条件优化:质粒用量、换液时间可根据成像效果梯度摸索,优化信号强度;

  3. 蛋白物种来源:仅微管 MAP4 质粒为小鼠序列,其余全部为人源序列;

  4. 质粒图谱:如需质粒图谱文件,联系客服索取;

  5. 适用性提示:转染效率、蛋白表达水平受细胞种类、细胞状态影响较大,需自行预实验验证,不保证适配全部细胞系。